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Tris-HCl/HEPES緩沖液應(yīng)用對(duì)比

更新時(shí)間:2022-05-12   點(diǎn)擊次數(shù):1394次

常用的緩沖液有很多,如磷酸鹽緩沖液、Tris-HCl緩沖液、HEPES緩沖液、氨基酸緩沖液等。不同的緩沖液差別液很大,今天主要來(lái)對(duì)比兩種常用的緩沖液:Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液各自的應(yīng)用對(duì)比。


1、Tris-HCl緩沖液的應(yīng)用


Tris常用于蛋白或者核酸的緩沖液,其在電泳緩沖液中與甘氨酸構(gòu)成緩沖體系,穩(wěn)定電泳過(guò)程中的pH,由于其具有弱堿性,水溶液的pH在10.5左右,可通過(guò)添加HCl或者NaOH制備不同pH的緩沖液,根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效范圍通常是pH 7.0-9.2之間。此外,Tris還可以制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物(磷霉素等)的中間物,在化妝品、醫(yī)藥、涂料以及合成中均有應(yīng)用。應(yīng)用于體內(nèi)時(shí),Tris作為一種不含鈉的氨基緩沖堿,在體液中與H2CO3結(jié)合,生成碳酸氫鹽。因此它能緩沖酸,而且能降低CO2張力,有糾正急性呼吸性酸中毒和代謝性酸中毒雙重效果,其作用較碳酸氫鈉快而強(qiáng)。


①M(fèi)oderna核酸疫苗(mRNA-1273,pH7.0-8.0)

將SM-102、DSPC、膽固醇以及PEG脂質(zhì)與溶于pH 5.0乙酸鹽緩沖液中的mRNA以2.5:1(脂質(zhì):mRNA)的比例混合,再將混合物用Tris-HCl(pH=7.5)中和,加入蔗糖作為冷凍保護(hù)劑,最后將制備得到的溶液進(jìn)行無(wú)菌過(guò)濾,-70℃下冷凍保存準(zhǔn)備進(jìn)一步使用。


處方:

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②恩利(注射用依那西普,Enbrel)

Enbrel是一個(gè)全人源的腫瘤壞死因子拮抗劑,是暢銷的藥物之一。

輔料:甘露醇,蔗糖,氨丁三醇(Tris)


2、HEPES緩沖液的應(yīng)用


HEPES緩沖液對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性作用,它是一種氫離子緩沖劑,能較長(zhǎng)時(shí)間控制恒定的pH范圍。使用時(shí)濃度為10-50mmol/L,一般培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/LHEPES即可達(dá)到緩沖能力。在體外診斷、DNA/RNA提取、脂質(zhì)體藥物等方面均有應(yīng)用。


①Onivyde® -伊立替康脂質(zhì)體

是一種拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑,與氟尿嘧啶和甲酰四氫葉酸組合,用于治療基于吉西他濱治療后疾病進(jìn)展的胰腺轉(zhuǎn)移性腺癌患者,為晚期大腸癌的一線用藥,也可用于術(shù)后的輔助化療;對(duì)肺癌、乳腺癌、胰腺癌等也有一定療效。


處方:

12.png

Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液都是生物制劑中常用的緩沖液,如何選擇需要結(jié)合制劑本身的特性和處方優(yōu)化的需求綜合考量。





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